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Fluorescenza sul posto L'ibridazione (FISH) è una delle numerose tecniche utilizzate per cercare il DNA delle cellule, cercando la presenza o l'assenza di geni specifici o porzioni di geni.Molti diversi tipi di cancro sono associati ad anomalie genetiche note. E dalla genetica, non stiamo parlando solo di ereditarietà. Nel corso della vita, le cellule possono commettere errori quando si dividono e crescono. Le mutazioni nel DNA associate al cancro possono accumularsi in queste cellule.
Come funziona
La FISH è una tecnica che utilizza sonde fluorescenti per rilevare geni specifici o parti di geni (sequenze di DNA). Il personale di laboratorio del centro medico e gli oncologi usano la FISH per aiutare a valutare i pazienti che possono avere il cancro e, a volte, per monitorare un paziente a cui è già stato diagnosticato un cancro e trattato.
La FISH può essere eseguita utilizzando vari tipi di campioni in base alla posizione e al tipo di cancro sospettato: cellule tumorali ottenute dal sangue periferico, da una biopsia del midollo osseo o da una biopsia dei linfonodi e tessuto incluso in paraffina fissato in formalina (questo si riferisce a un campione di tessuto che viene elaborato in laboratorio e incorporato in un tipo di cera, rendendolo più rigido, in modo che possa essere tagliato in sezioni sottili e montato per la visualizzazione al microscopio).
Cosa significano le lettere
La "H" in FISH si riferisce all'ibridazione. Nell'ibridazione molecolare, una sequenza di DNA o RNA etichettata viene utilizzata come sonda per visualizzare un mattoncino Lego rosso, se vuoi. La sonda viene utilizzata per trovare una controparte Lego brick, o sequenza di DNA, in un campione biologico.
Il DNA nel tuo campione è come pile di mattoncini Lego e la maggior parte dei mattoni in queste pile non corrisponde alla nostra sonda rossa. E tutti i tuoi mattoni sono organizzati ordinatamente in 23 paia di pile di mattoni: ogni pila è uno dei tuoi cromosomi omologhi accoppiati, più o meno. A differenza dei mattoncini Lego, la nostra sonda Lego rossa è come un potente magnete e trova la sua corrispondenza senza dover smistare le pile.
La "F" si riferisce alla fluorescenza. La nostra sonda rossa potrebbe perdersi tra le pile di mattoni, quindi è etichettata con un colorante fluorescente colorato in modo che risplenda. Quando trova la sua corrispondenza tra le 23 pile accoppiate, un'etichetta fluorescente rivela la sua posizione. Quindi, ora puoi vedere come ricercatori e medici potrebbero utilizzare FISH per identificare dove (quale pila o quale cromosoma) si trova un particolare gene per un dato individuo.
La "I" e la "S" stanno per sul posto. Questo si riferisce al fatto che il nostro mattoncino Lego rosso sta cercando la sua corrispondenza all'interno del campione che hai fornito.
PESCE e tumori del sangue specifici
PESCE e altro sul posto Le procedure di ibridazione vengono utilizzate per diagnosticare una varietà di anomalie cromosomiche: cambiamenti nel materiale genetico, cambiamenti nei cromosomi, inclusi i seguenti:
- Delezione: parte di un cromosoma è andato
- Traslocazione: parte di un cromosoma si stacca e si attacca a un altro cromosoma
- Inversione: parte di un cromosoma si stacca e si reinserisce, ma in ordine inverso
- Duplicazione: parte di un cromosoma è presente in troppe copie all'interno della cellula
Ogni tipo di cancro può avere il proprio insieme di cambiamenti cromosomici e le relative sonde. La FISH non solo aiuta a identificare i cambiamenti genetici iniziali in un processo patologico come il cancro, ma può anche essere utilizzata per monitorare la risposta alla terapia e la remissione della malattia.
I cambiamenti genetici rilevati dalla FISH a volte offrono informazioni aggiuntive su come il cancro di un individuo potrebbe comportarsi, sulla base di ciò che è stato osservato in passato in persone con lo stesso tipo di cancro e cambiamenti genetici simili. A volte la FISH viene utilizzata dopo che la diagnosi è già stata fatta, per raccogliere informazioni aggiuntive che potrebbero aiutare a prevedere l'esito di un paziente o il miglior trattamento.
La FISH può identificare anomalie cromosomiche nelle leucemie, inclusa la leucemia linfocitica cronica (LLC). Per la leucemia linfocitica cronica / piccolo linfoma linfocitico, la FISH consente ai pazienti di scoprire la loro categoria prognostica: buona, intermedia o scarsa. Nella leucemia linfoblastica acuta (LLA), la genetica delle cellule leucemiche può fornire informazioni sul livello di rischio di cancro e aiutare a guidare le decisioni terapeutiche.
I pannelli FISH sono disponibili anche per linfoma, mieloma multiplo, disturbi proliferativi plasmacellulari e sindrome mielodisplastica. Nel caso del linfoma mantellare, ad esempio, è presente un traslocazione che FISH può rilevare chiamato GH / CCND1 t (11; 14) che è frequentemente associato a questo linfoma.
Perché FISH?
Un vantaggio della FISH è che non deve essere eseguita su cellule che si stanno attivamente dividendo. I test citogenetici di solito richiedono circa tre settimane, perché le cellule tumorali devono crescere in piastre da laboratorio per circa 2 settimane prima di poter essere testate. Al contrario, i risultati FISH sono generalmente disponibili dal laboratorio entro pochi giorni.